Набор Elisa антитела Brucella

Спецификация

 

Процедуры тестирования и интерпретация

 

Шаг 1 Процедура тестирования

1.1 Приготовление раствора для мытья раствора

Wконцентрация wЖидкость для ужина:Перед использованием раствор для стирки должен быть восстановлен до комнатной температуры (20-25 степень) и равномерно встряхнуть, чтобы сделать его равномерным. Затем разбавьте в 20 раз больше концентрированного промывочного раствора очищенной водой (например, 5 мл концентрированного промывочного раствора добавляется в очищенную воду 95 мл), хорошо перемешайте, а разбавленная промывая жидкость может храниться при 2-8 градуса в течение 7 дней.

1.2 Подготовка образца

① Whate Animal Clood была взята, центрифугирована при 4000 об / мин в течение 10 минут, и супернатант был собран. Сыворотка также может быть коагулирована естественным путем без гемолиза.

② Когда размер выборки велик, чтобы убедиться, что экспериментальное время реакции было последовательным. Смешайте образец сыворотки с рабочим раствором антитела при 1: 1 в пластине разбавления (образец 70ul Serum + 70 UL Рабочая раствор антитела). Отрицательный контроль и положительный контроль такие же, как и образец сыворотки.

1.3 Процедура тестирования

① Наденьте микроплантинг на ферментной метке (в соответствии с количеством образцов, можно разобрать и использовать несколько раз), установить по двум лункам для отрицательных и положительных контролей, добавьте 100UL из предварительно смешанной смеси в микроплантинг с ферментом. Аккуратно встряхните образец в скважине, используя пленку для герметизации, чтобы покрыть тарелку, и инкубируйте при 37 градусах в течение 30 минут.

Open Пленка герметизации, стряхните раствор в пластинке, добавьте 300 мкл рабочей концентрации, промывая жидкость в каждую скважину, а затем выбросьте жидкость в скважине. Повторите вышеупомянутые шаги 5 раз и, наконец, высушите по чистой абсорбирующей бумаге.

③DИЛЛИЦАННЫЙ ФЕРМЕНТ КОНГАТАТ:Разбавьте конъюгат фермента (50 ×) 50 раз (например: концентрат конъюгата фермента 20ul + 980 UL DILUENT 1, требуемое определенное количество рассчитывается в соответствии с количеством испытательных образцов), хорошо перемешайте и откладывает.

Add 100 мкл фермента конъюгата по каждой скважине, покрывайте пластину и инкубируйте при 37 градусах в течение 30 минут.

⑤ В мытью ферментативную пластину, конкретная операция такая же, как и выше, ②.

Odd 100 мкл раствора субстрата в каждую скважину, накройте пластину и инкубируйте в течение 10 минут на 37 градусов от света.

⑦Add 50 мкл. Остановка раствора для каждой скважины и определите результат в течение 5 минут.

 

Шаг 2 интерпретация результата

 

Значение OD450 каждой скважины было считан на 96- чтения микропланшета.

2.1 Валидация

 

Среднее значение OD45 0 нм положительного контроля составляло <0,35, а среднее значение OD450NM отрицательного контроля/положительного контроля было больше или равно 3,5, экспериментальные результаты были допустимыми. В противном случае тест должен быть повторен.

2.2 Метод расчета

Для каждого образца вычислите PI (BlockingR ATE) следующим образом, используя скорректированную выборку и управляющие значения:

2.3 Результат интерпретации

Когда PI <20%считается негативным.

Когда PI> 30%, он считается положительным.

Когда на 20% меньше или равен PI меньше или равным 30%, он считается подозрительным и предлагает повторить выборку и тестировать через неделю.

горячая этикетка : Набор ELISA ELISA Brucella, China Brucell