Набор для определения антител к цирковирусу свиней типа-Ⅱ ИФА

Моющая жидкость рабочей концентрации: Перед использованием промывочный раствор следует довести до комнатной температуры (20-25 градусов) и равномерно встряхнуть, чтобы он стал однородным. Затем разбавьте в 20 раз концентрированный промывной раствор очищенной водой (например, 5 мл концентрированного промывочного раствора добавляют к 95 мл очищенной воды), хорошо перемешайте, и разбавленную промывочную жидкость можно хранить при температуре 2-8 градусов в течение 7 дней.

① Взяли цельную кровь животного, центрифугировали при 4000 об/мин в течение 10 минут и собрали супернатант. Сыворотку также можно коагулировать естественным путем без гемолиза.

② Разбавьте образец сыворотки 1:25 (добавьте 5 мкл образца сыворотки к 120 мкл разбавителя образца) и тщательно перемешайте.

Примечание. Отрицательный и положительный контроли разбавлять не требуется.

Разбавьте ферментный конъюгат в соотношении 1:25 (добавьте 5 мкл ферментного конъюгата к 120 мкл ферментного разбавителя) и тщательно перемешайте.

① Возьмите микропланшет с этикеткой с ферментом (в зависимости от количества образцов, его можно разобрать и использовать несколько раз), добавьте 100 мкл разведенной сыворотки к этикетке с ферментом Microplate, установите две лунки для отрицательных и положительных образцов и добавьте по 100 мкл для отрицательного и положительного контролей в лунку для реакции соответственно. Аккуратно встряхните образец в лунке, закрыв планшет герметизирующей пленкой, и инкубируйте при температуре 37 градусов в течение 30 минут.

②Откройте герметизирующую пленку планшета, стряхните раствор с лунки планшета, добавьте в каждую лунку по 300 мкл промывочной жидкости рабочей концентрации, а затем выбросьте жидкость из лунки. Повторите вышеуказанные шаги 5 раз и, наконец, высушите на чистой впитывающей бумаге.

③Добавьте по 100 мкл ферментного конъюгата в каждую лунку, накройте планшет и инкубируйте при температуре 37 градусов в течение 45 минут.

④Откройте герметизирующую пленку планшета, стряхните раствор с лунки планшета, добавьте в каждую лунку по 300 мкл промывочной жидкости рабочей концентрации, а затем выбросьте жидкость из лунки. Повторите вышеуказанные шаги 5 раз и, наконец, высушите на чистой впитывающей бумаге.

⑤Добавьте по 100 мкл раствора субстрата в каждую лунку, накройте планшет и инкубируйте в течение 10 минут при температуре 37 градусов вдали от света.

⑥Добавьте в каждую лунку по 50 мкл стоп-раствора и определите результат в течение 5 минут.